S/D残留量对SARS-CoV-2假病毒中和抗体检测方法的影响

摘要：

目的:评价有机溶剂/表面活性剂(solvent and detergent,S/D)法灭活后S/D残留量对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)的假病毒中和抗体检测方法(pseudotyped virus based neutralization assay,PBNA)的影响.方法:在严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SAPS)和2019冠状病毒病(coronavirus disease,COVID-19)患者恢复期血浆中加入0.1～10倍《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)规定残留标准”100μg·mL-1聚山梨酯80(吐温80)+10μ·mL-1磷酸三丁酯(TNBP)”浓度的S/D,模拟灭活后S/D残留量.用PBNA检测加入S/D前后的中和抗体水平,比较S/D对中和方法的影响.将不同浓度的S/D加入到SARS-CoV和SARS-CoV-2假病毒中进行灭活处理1、2和6h,检测假病毒的滴度,评价S/D对冠状病毒假病毒的灭活效果.结果:当S/D残留低于《中国药典》残留上限(100μg·mL-1吐温80-10 μg·mL-1 TNBP)时,SARS-CoV-2中和抗体EC50平均值与无S/D组的PBNA检测结果无统计学差异;当S/D残留大于25倍《中国药典》残留标准时,S/D对PBNA有显著影响.含有10mg·mL-1吐温80+1 mg·mL-1 TNBP的S/D试剂,室温静置1h即可以灭活SARS-CoV和SARS-CoV-2假病毒,假病毒滴度下降分别达到5.11和4.80log滴度,其灭活效果随着S/D的浓度下降而下降,S/D浓度为1％时无灭活效果.结论:S/D残留量对SARS-C0V-2的PBNA有显著影响,为保障PBNA的检测准确性,血浆中S/D残留量应不超过《中国药典》规定的标准,S/D试剂具有灭活2种冠状病毒假病毒的作用.

关键词：2019冠状病毒病、严重急性呼吸综合征冠状病毒2、假病毒、病毒灭活、中和抗体、恢复期血浆

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分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：十三五传染病重大专项课题资助项目2018ZX10731101-002-006;2018ZX10731101-002-009;2018ZX10731101-001-006

在线出版日期：2020-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：613-619