重组9型腺相关病毒基因组滴度测定方法的改进和初步验证

摘要：

目的:对重组9型腺相关病毒(rAAV-9)基因组滴度测定方法进行优化和初步验证,提高测定结果的精密度.方法:通过比较SDS和EDTA及不同浓度SDS的裂解效果,对病毒裂解方法进行优化;通过比较质粒和病毒分别做对照品时的测定结果,选择合适的对照品;通过比较平行线法和传统单点法的分析结果,选择合适的统计方法.结果:SDS裂解效果显著高于EDTA,终浓度为0.1％的SDS裂解效果最佳;以病毒为对照品,采用平行线法进行统计分析的结果变异度最小(RSD为13.7％),优于质粒做对照品的检测结果(RSD为35.9％)及单点法的分析结果(RSD为23.1％).结论:本方法优于传统的重组腺相关病毒基因组滴度测定方法,可应用于以rAAV-9为栽体的基因治疗药物的质量控制.

关键词：重组9型腺相关病毒、基因治疗载体、实时荧光定量PCR技术、基因组滴度、平行线法、同质对照品、精密度

所属期刊栏目：40

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家科技重大专项课题资助项目2018ZX09733002-005

在线出版日期：2020-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：58-61