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10.16155/j.0254-1793.2020.01.08

牛痘病毒粒细胞巨噬细胞集落刺激因子注射液的生物学活性测定方法研究

引用
目的:建立牛痘病毒粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(vaccinia virus/GM-CSF)注射液的生物学活性测定方法.方法:采用噬斑法进行感染滴度测定,结合定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,Q-PCR)进行病毒基因组滴度/感染滴度测定;采用TF-1细胞增殖法,四参数方程拟合处理试验数据,检测不同浓度梯度的样品感染Hela细胞后表达的GM-CSF生物学活性;采用ELISA法,二次方程拟合处理试验数据,检测不同浓度梯度样品感染Hela细胞后的GM-CSF的表达量;采用ELISA法进行β半乳糖苷酶活性测定;采用肿瘤细胞(UACC 257)和正常细胞(GM 00038)进行溶瘤活性测定.结果:测定了1批牛痘病毒粒细胞巨噬细胞集落刺激因子注射液,其病毒感染滴度为6.5×108 PFU· mL-1,病毒基因组滴度/感染滴度为27,各浓度梯度孔GM-CSF表达量均大于10 pg,GM-CSF生物学活性为181 rGCU,溶瘤活性为144 rOnU,β-半乳糖苷酶活性为124 rBU.结论:对牛痘病毒GM-CSF注射液的生物学活性进行了相对全面的测定,各个项目均符合规定,能够用于该产品的质量控制,同时对同类产品的质量控制具有借鉴意义.

牛痘病毒、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、生物学活性、感染滴度、溶瘤活性、β-半乳糖苷酶活性、GM-CSF的表达量、基因治疗、质量控制

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R917(药物基础科学)

国家科技重大专项课题资助项目2018ZX09733002-005

2020-05-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

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药物分析杂志

0254-1793

11-2224/R

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2020,40(1)

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