反相高效液相色谱法测定重组人溶菌酶的含量及纯度

摘要：

目的:建立重组人溶菌酶含量及纯度的反相高效液相色谱(RP-HPLC)检测方法.方法:采用Welch Ultimate XB-C1s色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),含0.1％三氟乙酸和0.9％氯化钠的水溶液为流动相A;含0.1％三氟乙酸和0.9％氯化钠水溶液-乙腈(40∶60)为流动相B;检测波长280 nm,柱温32℃,流速1.0 mL· min-1,线性梯度洗脱.结果:本方法专属性良好;供试品48 h内稳定,RSD为0.51％;重复性RSD为0.46％,中间精密度不同工作日间的RSD为0.52％,不同实验员间的RSD为0.53％;定量下限200 ng、检测下限30 ng;在进样量10～60 μg范围内,线性关系良好,r=0.999 9;平均回收率(n=9)99.7％,RSD为0.94％.测定3批重组人溶菌酶冻干粉含量分别为36.5％、32.8％和31.1％;纯度均大于98％.结论:方法学验证表明,该方法符合定量检测重组人溶菌酶含量和纯度的要求,适用于重组人溶菌酶的质量控制.

关键词：重组人溶菌酶、反相高效液相色谱法、定量检测

所属期刊栏目：38

分类号：R917(药物基础科学)

在线出版日期：2019-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：2167-2174