骨形态发生蛋白-2单克隆抗体的制备及评价

摘要：

目的:制备骨形态发生蛋白-2 (BMP-2)单克隆抗体,并对其进行评价.方法:用重组人源BMP-2蛋白(rh BMP-2)对小鼠进行免疫;确认小鼠血清BMP-2抗体检测阳性后,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞按3∶1的比例融合得到杂交瘤细胞株;用间接竞争ELISA法筛选BMP-2阳性单克隆杂交瘤细胞;用常规Protein G进行纯化得到BMP-2单克隆抗体,并对其纯度、表位构相,特异性进行评价.结果:成功制备BMP-2单克隆抗体,其亚型为IgG2a,κ,纯化后的SDS-PAGE纯度大于90％.评价结果表明,本课题组研制的BMP-2抗体与rhBMP-2的结合位点为非线性表位,且特异性优于市售抗体,与BMP家族的BMP-4、BMP-5、BMP-7无交叉反应.结论:本课题组研制的单克隆抗体特异性好,效价高,可用于建立酶联免疫方法,检测骨修复材料中BMP-2含量.

关键词：单克隆抗体、骨形态发生蛋白-2 (BMP-2)、重组人源BMP-2蛋白(rhBMP-2)、表位构相、特异性、骨修复材料、BMP-2含量

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分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：科技部重点研发计划2016YFC1103203

在线出版日期：2018-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1310-1317