SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法同时测定不同产地大蒜药材中的蒜酶与凝集素

摘要：

目的:建立SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳同时测定不同产地大蒜药材中蒜酶与凝集素相对含量和相对分子质量的方法.方法:通过考察溶媒方法、样品前处理方法、供试品溶液浓度等因素,确定SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蒜酶与凝集素的最佳条件:以超纯水为溶媒,静置10 min为前处理方法,供试品溶液质量浓度为28 mg· mL-1;分别配制5％浓缩胶、12％分离胶,凝胶厚度为1 mm,浓缩胶电压为80V,分离胶电压为100 V,进行不连续体系垂直板电泳,借助Gel-pro Analyzer软件分析凝胶电泳图谱.以标准蛋白为marker,建立标准曲线,将蒜酶和凝集素的比移值代入标准曲线方程,计算蒜酶和凝集素的相对分子质量.结果:标准曲线方程为lgM=-1.369 1X+2.184 7,r=0.966 6.大蒜药材中蒜酶相对分子质量为52.1～54.0 kDa,凝集素相对分子质量为11.0～11.8 kDa.不同产地大蒜药材中蒜酶和凝集素总相对含量为18.1％～77.2％,其中蒜酶的相对含量为5.60％～27.1％,凝集素的相对含量为12.5％～68.2％.新疆巴里坤市大蒜样品中蒜酶的相对含量最高为27.1％,新疆阿克苏拜城县大蒜样品中凝集素的相对含量最高为68.2％.不同产地大蒜药材中蒜酶、凝集素的相对含量存在差异,凝集素相对含量普遍高于蒜酶相对含量.结论:与其他测定蛋白质含量的方法相比,本文建立的方法操作简便,样品用量少,能够准确测定大蒜药材中蒜酶及凝集素的相对分子质量与相对含量.不同产地大蒜中蒜酶与凝集素相对总合量均达50％以上,证明蒜酶和凝集素是大蒜中的主要蛋白质.大蒜中的蒜酶与蒜氨酸相对含量的相关性并不显著.

关键词：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法、大蒜、蒜酶、凝集素、蛋白质、溶媒选择、样品前处理

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分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：新疆维吾尔自治区项目2016DOIC157

在线出版日期：2018-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：948-954