UPLC/Q Exactive MS检测肉苁蓉多糖促PC12细胞释放神经递质的方法研究

摘要：

目的:建立UPLC/Q Exactive MS法测定PC12细胞释放的神经递质多巴胺、去甲肾上腺素和谷氨酸含量.方法:采用Ultimate 3000系列高效液相色谱仪和Q Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱系统检测.标准品用超纯水溶解后,以乙腈-水(0.1％甲酸,10 mmol· L-1醋酸铵)(4∶96)为流动相,Hypersil GOLD色谱柱分离,通过高分辨质谱的全扫描/选择离子监测(Full MS/SIM)模式进行定性筛查和定量检测.应用Sigma Plot12.0统计软件包进行数据分析.结果:多巴胺和谷氨酸在3～2 000ng· mL-1浓度范围内线性关系良好,最低定量限为3 ng·mL-1;去甲肾上腺素在100～2 000 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好,最低定量限为100 ng· mL-1;3种神经递质的加标回收率高,精密度RSD均小于5％;常温放置8h,4℃冷藏7d后以及-20℃冷冻1个月后稳定性良好.本实验同时在药物肉苁蓉多糖(CDPS)改善学习记忆功能已有研究的基础上,测定PC12细胞给药后3种神经递质不同时间点的释放浓度,结果显示CDPS对3种神经递质释放量有明显促增趋势.结论:UPLC/Q Exactive MS法适合同时测定PC12细胞分泌的多巴胺、去甲肾上腺素和谷氨酸的含量.

关键词：PC12细胞、多巴胺、去甲肾上腺素、谷氨酸、神经递质、UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱

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分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家自然科学基金;内蒙古科技厅项目;内蒙古教育厅项目;内蒙古教育厅项目

在线出版日期：2017-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1667-1674