利用荧光素酶报告基因检测维生素D生物活性

摘要：

目的:为维生素D生物活性或类维生素D活性的药物筛选建立体外检测模型.方法:利用分子生物学技术构建了含有荧光素酶报告基因的载体.PCR扩增CYP24A1启动子上下游区域,并插入到含有红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)和荧光素酶报告基因(luciferase reporter gene)的pRP-RFP-luciferase载体中.经PCR、双酶切和测序鉴定后,转染至Hela细胞,以RFP的表达反映转染效率,荧光素酶的活性水平反映维生素D药物活性的强弱.结果:经鉴定,构建的荧光素酶报告基因载体转染Hela细胞后有红色荧光表达,荧光素酶报告基因检测可有效反映l,25(OH) 2D3生物活性.结论:在体外细胞水平上,利用荧光素酶报告基因检测维生素D生物活性的方法简单可行,为后续筛选和研发具有维生素D活性的药物奠定基础.

关键词：维生素D、荧光素酶报告基因、活性测定、药物筛选、体外检测模型

所属期刊栏目：37

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：汉中市科技局项目2014ZKC47-07;陕西理工学院博士启动项目SLGQD132-22;陕西省科技创新团队项目2012KCT-29

在线出版日期：2017-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1275-1279