10.16155/j.0254-1793.2017.07.16
利奈唑胺单抗的制备及其荧光免疫层析检测法的建立
目的:建立一种简便、快速、特异的利奈唑胺血药浓度荧光免疫层析检测法.方法:将脱乙酰利奈唑胺定向合成具有单一羧基结构的利奈唑胺衍生物.采用碳二亚胺法将利奈唑胺衍生物与牛血清蛋白和卵清蛋白分别偶联制备完全抗原.将利奈唑胺-牛血清蛋白偶联物免疫Balb/c小鼠制备单克隆抗体.荧光标记利奈唑胺单抗,将利奈唑胺-卵清蛋白完全抗原和羊抗兔IgG抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,以竞争性免疫抑制反应模式建立了利奈唑胺血药浓度荧光免疫层析检测法.基于以上检测方法建立利奈唑胺的标准曲线,并对该检测法进行方法学评价.并采用HPLC方法测定,对两方法的结果进行比较.结果:通过优化体系,所建立的检测法IC50=5.28 μg·mL-1,线性范围为0.78~50 μg· mL-1,灵敏度为0.61 μg·mL-1,精密度均小于10%,回收率为78.4%~123%.与14种与利奈唑胺结构相似以及联合用药相关药物无明显交叉反应.分别检测67份临床利奈唑胺血样与HPLC法对比,发现2种方法相关性较好,R2=0.929,大于0.90.结论:本实验成功建立了一种操作简便、快速、高灵敏度、特异性强的利奈唑胺荧光免疫层析检测方法,为进一步临床血药浓度监测的应用打下了基础.
利奈唑胺、利奈唑胺衍生物、抗原、单克隆抗体、荧光免疫层析检测、高效液相色谱法
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R917(药物基础科学)
湖州市科学技术局公益性技术应用研究一般项目2013GYB12
2017-08-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共9页
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