SD大鼠连续灌胃给药对碱性彗星电泳和骨髓微核的影响

摘要：

目的:开展SD大鼠3天重复经口灌胃给药毒性实验,联合肝、肾和外周血碱性彗星电泳试验和骨髓微核试验,并对遗传毒性试验常用的溶媒及阳性化合物进行检测和比较.通过对比相同实验条件下开展的以染色体损伤和DNA断裂为检测终点的组合遗传毒性试验结果,为给药和取材时间点以及阳性剂的选择提供参考依据.方法:雄性SD大鼠随机分为去离子水组、0.9％氯化钠注射液组、玉米油组、环磷酰胺(CPA) 10mg· kg-1组、环磷酰胺(CPA) 40 mg·kg-1组、Ⅳ-乙基-N-亚硝基脲(ENU) 40 mg· kg-1组和甲磺酸乙酯(EMS) 200mg·kg-1组,每组5只.连续3d灌胃给药,实验期间记录动物临床症状和体重变化.末次给药后3h处死大鼠.称量肝、肾脏器重量,并收集肝、肾及外周血制备单细胞悬液开展多脏器碱性彗星试验.样本制片后分别经裂解、解旋、电泳、染色等步骤,使用Komet 6.0软件进行图像分析;取材同时收集骨髓细胞制作涂片,计数2 000个嗜多染红细胞(PCE)的含微核细胞发生率.结果:1)CPA、ENU和EMS均未对动物整体产生严重的毒性作用.2)只有EMS组的肝细胞、肾细胞和淋巴细胞的刺猬细胞百分率明显升高,CPA及ENU对刺猬细胞百分率无明显影响.ENU组在3种组织的彗尾DNA含量百分率及Ohve尾矩与溶媒对照组比较为弱致DNA断裂作用;而EMS则在3种组织中均显示了强致DNA断裂作用.3)CPA作为经典的骨髓微核试验阳性剂,其微核结果显示了一定的剂量相关性;ENU的致微核作用相对较弱.结论:将多脏器彗星试验与微核试验与3天重复给药毒性实验整合是可行的;实验流程的标准化、阳性剂的选择及实验设计等需根据具体情况来设计.

关键词：药物安全性试验、遗传毒性试验、阳性对照物、阴性对照物、氯化钠、玉米油、环磷酰胺、N-乙基-N-亚硝基脲、甲磺酸乙酯、碱性彗星电泳、骨髓微核试验

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分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：中国食品药品检定研究院中青年发展研究项目;重大新药创制"科技重大专项

在线出版日期：2017-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1063-1070