RNA干扰Gα13对人卵巢癌HO-8910PM细胞侵袭转移的影响

摘要：

目的:利用小干扰RNA技术沉默Gα13基因的表达,探讨其对人卵巢癌HO-8910PM细胞生长与转移的影响.方法:以Shuttle Vector 1.O-CMV为载体,构建针对Gα13的shRNA重组表达质粒;转染人卵巢癌细胞HO-8910PM,利用RT-PCR和Western Blot分别检测Gα13基因mRNA和蛋白的表达水平.体外通过MTT法、Transwell小室、Matrigel胶模型、流式细胞术,观察Gα13被沉默后对人卵巢癌HO-8910PM细胞生长与侵袭转移的影响;放射自显影方法分析Rho GTPases活性.结果:RT-PCR和Western Blot结果显示,Shuttle Vector 1.0-CMV Gα13 B siRNA转染组Gα13基因的表达水平被有效抑制.与对照组相比,Shuttle Vector 1.0-CMV Gα13 B siRNA转染组的细胞侵袭、迁移力明显下降(P＜0.01),细胞被阻滞在G0/G1期,且膜上Rho GTPases与GTP结合活性明显下降.结论:靶向Gα13的重组shRNA质粒能够有效抑制Gα13基因在HO-8910PM细胞中的表达,并能降低HO-8910PM细胞侵袭迁移的能力,其机制可能与降低细胞膜上Rho GTPases活性有关,可为卵巢癌的靶向治疗提供参考.

关键词：溶血磷脂酸、RNA干扰技术、侵袭迁移、基因表达、卵巢癌

所属期刊栏目：37

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：广东省科技计划;湛江市财政资金科技专项

在线出版日期：2017-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：90-96