GC-MS衍生化法测定大鼠血浆中内源性5-雄烯二醇及药动学研究

摘要：

目的:采用SIM模式,建立一种快速、灵敏的GC-MS衍生化方法测定大鼠血浆中5-雄烯二醇.方法:以脱氢表雄甾酮-2,2,3,4,4,6-d6(DHEA-d6)为内标,血浆样品经过甲基叔丁基醚(MTBE)提取,离心,取上清液氮气吹干,通过BSTFA-TMCS(99:1)衍生化后进行GC-MS分析.RESTEK色谱柱:Rxi(R)-5 ms(30 m×0.25μm×0.25 mm);程序升温:初始温度为60,维持1 min,以40·min-1速率升至220℃,再以5℃·min-1的速率升至300 ℃,维持5 min;采用选择离子扫描模式(SIM),5-雄烯二醇的定性离子为m/z 434、344,定量离子为m/z 344,DHEA-d6的定性离子为m/z366、276,定量离子为m/z 276.结果:血浆中5-雄烯二醇质量浓度在80～5 000 ng·mL-1范围内线性关系良好(r2=0.999 3);低、中、高3个浓度的准确度在70％～103％之间;日内、日间精密度均小于5％;提取回收率(n=4)在75.96％～104.01％;低、高2个浓度的血浆样品在室温放置12h,4℃冰箱中放置24h,-20℃保存30 d、反复冻融4次,以及衍生化后的样品室温放置4、8、12、24 h均能保持稳定.大鼠皮下注射5-雄烯二醇混悬液的药-时曲线符合二室模型,其药代学参数为T1/2为(26.45±8.40)h,AUC(0-t)为(2 887.46±1 033.70)μg·h-1·L-1.结论:本方法经方法学验证,可作为大鼠血浆中5-雄烯二醇含量的测定方法,适合药动学研究.

关键词：5-雄烯二醇、内源性激素、抗辐射药物、脱氢表雄甾酮内标、DHEA-d6、血药浓度、药动学研究、双(三甲基硅基)三氟乙酰胺、BSTFA、三甲基氯硅烷、TMCS、衍生化、气相色谱-质谱法、GC-MS

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分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家自然科学基金;北京市自然科学基金;重大新药创制"科技重大专项十二五

在线出版日期：2016-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：961-967