ELISA抑制法检测动物组织中α1,3-Gal抗原

摘要：

目的:用人工合成的Gal/BSA抗原对骨髓瘤细胞的Gal抗原表位数进行赋值;再用骨髓瘤细胞作为参照品,建立并优化单克隆特异性抗体M86检测动物组织中αl,3-Gal(Gal)抗原的ELISA抑制法.应用优化后的方法,检测猪和小鼠组织Gal抗原表位数.方法:将待测物抗原(Gal-BSA系列稀释液、SP2/0细胞及待检组织样品)与M86特异性抗体反应后离心,取含有M86剩余抗体的上清液;再与Gal-BSA包被的同相抗原反应,计算出待测样品和标准曲线样品的M86结合抑制率;之后绘制相应的质量浓度-结合抑制率曲线,再根据曲线拟合公式计算其50％结合抑制时的质量浓度;进而计算Gal抗原表位数.结果:各结合抑制曲线相关性较好,R2 ＞0.95.SP2/0骨髓瘤细胞Gal抗原数为每个细胞6.19×108个;利用优化了的方法检测猪的冻干组织抗原含量趋势为:肺＞肾＞脾＞心＞腹膜＞心包膜＞肝组织＞皮肤;小鼠的新鲜湿组织抗原含量趋势为:心＞肺＞脾＞肾＞肝.结论:应用骨髓瘤细胞作为参照品,所建立的M86抗体ELISA抑制法检测动物组织的Gal抗原含量具有较好的敏感性和特异性,为进一步建立该方法规范性的行业标准奠定了基础.

关键词：动物源性生物材料、免疫排斥反应靶抗原检测、Gal抗原、M86特异性抗体、ELISA抑制法

所属期刊栏目：35

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：再生型医用植入器械国家工程实验室首席专家PI项目;国家高技术研究发展计划（863计划）

在线出版日期：2015-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1729-1735