甲型流感病毒NP含量ELISA检测方法的建立

摘要：

目的:建立一种双抗体夹心ELISA检测方法,以检测流感疫苗中甲型流感病毒的核蛋白(NP)含量.方法:体外重组表达NP作为ELISA法测定蛋白含量参考品,筛选捕获抗体和检测抗体工作浓度、起始浓度和系列稀释倍数,建立ELISA法并对其进行优化和验证.结果:获得的重组NP纯度为99.0％以上.建立和优化后的ELISA参数:捕获抗体4μg· mL-1,检测抗体1∶1 000.NP含量参考品起始浓度为300 ～600 ng·mL-1,四参数拟合S型曲线的决定系数R2大于0.95,对疫苗中的甲型流感病毒NP具有特异性,原液和成品的加标回收率为88.2％～ 95.3％,方法重复性(n=5)的RSD小于15％.结论:建立的流感疫苗中甲型流感病毒NP含量ELISA检测方法特异性好,准确性和精密性高,可用于疫苗样品中甲型流感病毒NP含量的检测.

关键词：甲型流感病毒、核蛋白(NP)、重组NP、酶联免疫吸附测定(ELISA)、捕获抗体、检测抗体

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分类号：R917(药物基础科学)

在线出版日期：2015-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1556-1561