SPE-LC-MS/MS法测定人外周血单核细胞内齐多夫定三磷酸化物

摘要：

目的:建立人外周血单核细胞(hPBMCs)内齐多夫定三磷酸化物(ZDV-TP)的固相萃取-液相色谱-串联质谱(SPE-LC-MS/MS)测定方法,并将其应用于临床试验中ZDV-TP在hPBMCs内浓度的测定.方法:hPBMCs样本采用强阴离子交换固相萃取小柱实现ZDV-TP与齐多夫定(ZDV)、齐多夫定一磷酸化物(ZDV-MP)和齐多夫定二磷酸化物(ZDV-DP)的分离后,加入酸性磷酸酶将其去磷酸化为等物质的量的齐多夫定原药.去磷酸化后的样本经HLB固相萃取小柱脱盐处理后,采用Agilent XDB-C18色谱柱,以0.2％甲酸水溶液-甲醇为流动相进行等度洗脱.采用ESI正离子模式检测,离子监测方式为MRM,用于定量分析的离子反应分别为m/z 267.9→m/z 126.8(ZDV)和m/z 247.9→m/z120.8(替硝唑,内标).结果:ZDV-TP在0.112 5～82.05 ng·mL-1(每106个细胞含ZDV-TP 0.06 ～ 43 pmol),范围内线性良好(r=0.997 1),定量下限为0.112 5 ng·mL-1.日内及日间精密度(RSD)均小于9.0％,回收率和基质效应均符合生物样本的测定要求.结论:本文所建立的方法灵敏度高,专属性强,且成功应用于临床试验中ZDV在hPBMCs内的ZDV-TP的测定.

关键词：固相萃取-液相色谱-串联质谱法(SPE-LC-MS/MS)齐多夫定、齐多夫定三磷酸化物、人外周血单核细胞(hPBMCs)、生物样本检测

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分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家自然科学基金;湖南省科技计划;中南大学研究生自主探索项目

在线出版日期：2015-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1363-1368