冬虫夏草与5种人工发酵菌丝体的DNA分子鉴别方法

摘要：

目的:建立冬虫夏草与人工发酵菌丝体的鉴别方法.方法:通过聚合酶链式反应(PCR),扩增基因组上的核糖体基因内转录间隔区(ITS),继而用限制性内切酶Xho Ⅰ对该聚合酶链式反应产物进行酶切,将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳及紫外成像;通过聚合酶链式反应扩增线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ (COⅠ)的编码基因,将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳及紫外成像.结果:冬虫夏草ITS的PCR产物能够被Xho Ⅰ酶切成2个片段.而5种人工发酵菌丝体中,有4种不能够被酶切;由于来源于冬虫夏草无性型中华被毛孢,百令胶囊可被酶切且切割条带大小与冬虫夏草组一致.冬虫夏草样品全部扩增得到COⅠ基因(CO Ⅰ)片段,而5种人工发酵菌丝体均未扩增出该片段.结论:结合聚合酶链式反应限制性内切酶片段长度多态性法以及COⅠ聚合酶链式反应扩增,可以鉴别冬虫夏草与人工发酵菌丝体.

关键词：冬虫夏草、DNA鉴别、聚合酶链式反应(PCR)、内转录间隔区(ITS)、细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因

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分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家自然科学基金;重大新药创制"科技重大专项;重大新药创制"科技重大专项

在线出版日期：2015-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1354-1357