EML4-ALK融合基因变体1和变体3质控品的建立

摘要：

目的:建立EML4-ALK融合基因质控品,用于评价人类EML4-ALK融合基因突变检测试剂盒的性能.方法:根据人类EML4-ALK融合基因序列,合成EML4-ALK融合基因变体1(V1)和变体3(V3)的基因序列.采用限制性内切酶KpnⅠ和HindⅢ对带有目的基因的质粒和表达载体分别进行酶切,将目的基因与载体连接,转化DH5α感受态细胞,筛选阳性菌落进行测序.将测序结果正确的单个菌落进行超声诱导,制备假病毒溶液,并用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对假病毒溶液提取的RNA进行检测.结果:对人类EML4-ALK融合基因V1和V3质控品进行序列测定和荧光定量RT-PCR检测,结果表明成功建立了人类EML4-ALK融合基因V1和V3假病毒质控品.结论:本研究建立了人类EML4-ALK融合基因变体假病毒质控品的方法.可为药物靶向治疗基因检测试剂质量控制提供参考.

关键词：靶向药物、分子靶向治疗、棘皮动物微管相关蛋白样4(EML4)、融合基因变体、RNA检测、RT-PCR法、基因检测试剂、质控品建立、标准物质研究

所属期刊栏目：35

分类号：R917(药物基础科学)

在线出版日期：2015-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：500-505