抗HCV复制调控区药物体外筛选模型的建立

摘要：

目的:建立抗丙型肝炎病毒(HCV)复制调控区体外药物筛选模型.方法:将全长HCV的5'非翻译区(5' UTR)的cDNA克隆至启动子探测载体pEGFP-1,构建重组载体p5'NCR-EGFP,并转染至人肝癌细胞系HepG2.获得的转染细胞以荧光显微镜检测及原位杂交法验证,并经流式细胞术分选.通过干扰素与利巴韦林2种常规抗病毒药物对所构建的模型进行初步应用.结果:荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白(EGFP)的强表达,原位杂交检测到转染细胞的核区有特异性杂交信号.流式细胞术可检测到表达EGFP的阳性细胞达95％以上.初步运用结果显示,γ干扰素对该模型有明显的抑制作用,而利巴韦林及α-2b干扰素在本模型上的抑制作用较弱.结论:该细胞模型经验证可以成为体外筛选抗HCV复制调控区药物的模型.

关键词：抗丙型肝炎病毒(HCV)药物、药物筛选模型、5’非翻译区、cDNA克隆、转染细胞、抗病毒药物、干扰素、利巴韦林、荧光显微镜检测、原位杂交法、绿色荧光蛋白(EGFP)

所属期刊栏目：34

分类号：R917(药物基础科学)

在线出版日期：2014-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1796-1801