HPLC法测定地特胰岛素有关物质及主要杂质鉴别
目的:探索和建立地特胰岛素的纯度分析测定方法,并对主要杂质进行鉴别.方法:采用RP-HPLC方法分离分析地特胰岛素的有关物质,使用Protronavi C4色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm,300 A),流动相A为0.2 mol·L-1硫酸钠缓冲液(pH2.3)-乙腈(82∶ 18),流动相B为水-乙腈(40∶60),洗脱梯度(0 min,35％ B;45 min,67％ B;65 min,67％ B;66 min,35％ B;80min,35％B),流速1.0 mL·min-1,检测波长214 nm,柱温45℃.同时收集该色谱条件下的最大杂质组分,利用LC-MS/MS方法进行鉴别.液质条件为:液相色谱分离采用Acquity UPLC BEH300 C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),流动相A为含0.1％甲酸的水溶液,流动相B为含0.1％甲酸的乙腈溶液,30 min内B相由5％升至30％,流速为300 nL·min-,洗脱时间为30 min.质谱离子源为纳升级电喷雾离子源,采用正离子模式检测.结果:建立的RP-HPLC纯度分析方法具有良好的方法学验证结果,能准确测定样品中的有关物质;LC-MS/MS鉴定了地特胰岛素中的最大杂质为A链第21位天冬酰胺的脱氨产物.结论:建立的RP-HPLC和LC-MS/MS方法可准确有效地对地特胰岛素有关物质进行定量测定和鉴别分析,可作为地特胰岛素的质量研究和质控分析方法.
地特胰岛素、纯度、有关物质、杂质鉴别、脱氨天冬酰胺、反相高效液相色谱、液相色谱-质谱联用
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R917(药物基础科学)
中国食品药品检定研究院中青年发展基金资助项目2011A5
2014-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1497-1503
