HPLC法体外筛选黄嘌呤氧化酶抑制剂

摘要：

目的:建立HPLC体外筛选黄嘌呤氧化酶抑制剂的方法.方法:采用HPLC法测定酶促反应体系中底物黄嘌呤在反应前后含量的变化,以此考察待测样品对黄嘌呤氧化酶的抑制作用.色谱条件:采用Agilent SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以0.02 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(含甲醇1％)为流动相,流速1.0 mL·min-1,柱温为室温,检测波长254 nm,进样量20 μL.结果:在该色谱条件下,酶促反应体系中的黄嘌呤与其他成分分离度良好.利用该方法对14种中药进行了筛选,发现使君子、苏木、虎杖和牡丹皮四味中药的70％乙醇提取物对黄嘌呤氧化酶抑制作用较强,其IC50分别为10.04、8.02、2.06和1.36mg· mL-1.针对活性较好的苏木,对从其分离得到的24个化合物进行活性筛选,发现化合物7,3',4'-三羟基-3-苄基-2氢-苯并吡喃、3-去氧苏木酮B、苏木查尔酮和原苏木素A具有一定的活性.结论:该方法简单可行,准确性较高,可用于黄嘌呤氧化酶抑制剂的快速筛选.

关键词：高效液相色谱、黄嘌呤氧化酶抑制剂、使君子、苏木、虎杖、牡丹皮、7、3’、4’-三羟基-3-苄基-2氢-苯并吡喃、3-去氧苏木酮B、苏木查尔酮、原苏木素A

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分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家自然科学基金No.81072544

在线出版日期：2014-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1391-1396