基于DNA熔解曲线分析技术的三七粉分子鉴定

摘要：

目的:针对市售三七粉掺入其他粉末导致鉴别困难的问题,建立熔解曲线分析方法,以实现简便、快速鉴别三七粉的目的.方法:采集不同产地的三七原植物30株,市售成药三七粉10批以及大米、土豆、小麦、小米、大豆粉末等常见掺假粉末.所有样品提取总DNA,筛选适合片段及引物,分别构建三七、伪品、三七与伪品等比例混合样品DNA的熔解曲线.对退火温度、循环次数以及模板浓度进行优化,建立三七粉DNA熔解曲线分析真伪鉴别方法,并对其精密度和重复性进行考察.结果:选择psbA-trnH作为鉴别引物,在退火温度为58 ～ 62℃、循环数为35～40条件下,DNA模板0.78～ 483.20 ng·μL-范围内进行熔解曲线分析,可通过熔解曲线峰形比对,在未获得伪品信息的情况下进行三七粉真伪及掺杂品鉴别.结论:熔解曲线分析技术依据熔解曲线的峰形和Tm值大小即可区分不同三七样品的DNA,其直观的特点在该药材掺假品快速检测方面具有独特的优势.

关键词：熔解曲线、三七粉、分子鉴定、快速检测、中药材掺假识别、中药DNA分析

所属期刊栏目：34

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：中医药行业科研专项;道地中药功能基因组北京市重点实验室阶梯计划

在线出版日期：2014-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1384-1390