Biacore法测定重组人乳头瘤病毒双价(16/18型)疫苗原液的动力学常数
目的:建立Biacore法测定重组人乳头瘤病毒双价(16/18型)疫苗原液的动力学常数.方法:分别将HPV 16·V5中和单抗与HPV 18·J4中和单抗偶联到CM5芯片上,然后根据Biacore X-100 Kinetics/Affinity控制软件将HPV 16L1和HPV18L1原液分别稀释至适当的不同浓度,采用50 mmol·L-1氢氧化钠溶液作为再生液进行动力学分析.根据Biacore X-100Evaluation分析软件进行拟合,得到样品的动力学常数KD值.结果:Biacore法测定重组人乳头瘤病毒16型、18型原液动力学常数KD分别为4.844 × 10-10 mol·L-1和1.67 × 10-10 mol·L-1,HPV 16L1和HPV 18L1原液在浓度为0.625~40 μg· mL-1时线性关系良好(HPV16L1:Y=17.77X-0.0184,r=1.000;HPV 18L1:Y=18.73X+5.282,r=0.9957).HPV 16L1和HPV18L1原液精密度和稳定性试验的RSD均<20%.并且Biacore法测定的结合常数ka值和体外相对效力测定(IVRP法)的EC50值之间具有一定的相关性.结论:该方法实时、简便、快速、准确、灵敏,适用于重组人乳头瘤病毒原液的动力学分析.
人乳头瘤病毒16型、人乳头瘤病毒18型、动力学常数、Biacore、表面等离子共振、体外相对效力测定
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R917(药物基础科学)
上海人才发展资金资助项目2011017
2014-04-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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215-220