使用碱裂解法快速提取药材DNA方法的研究

摘要：

目的:建立药材DNA快速提取方法.方法:使用碱裂解缓冲液提取药材DNA,考察提取液配方组成和中和剂种类对药材DNA纯度、浓度的影响.利用优化提取液提取了144个中药材DNA,动物药使用CO Ⅰ、植物药使用psbA-trnH通用引物进行PCR扩增.结果:0.5 mol·L-1氢氧化钠、1％ PVP和1％ Triton×100具有最佳的DNA提取效果.对144个中药材进行PCR扩增,利用琼脂糖凝胶电泳可检测到123个中药材DNA的PCR产物.碱裂解法可用于快速提取蛇类药材DNA,并成功用于乌梢蛇、金钱白花蛇的分子鉴定.结论:优化的碱裂解法可用于提取中药材基因组DNA,其提取时间可控制在10 min左右,且避免了酚、三氯甲烷等对人体有毒试剂的使用,对药材快速分子鉴定体系的建立将发挥重要作用.

关键词：DNA提取、碱裂解法、快速分子鉴定、中药材、中药鉴定、蛇类药材、聚合酶链式反应

所属期刊栏目：33

分类号：R917(药物基础科学)

在线出版日期：2013-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：1081-1090