基因工程单克隆抗体N-端氨基酸序列的测定

摘要：

目的:建立了具有焦谷氨酸封闭N-端的重组抗体N-端氨基酸序列分析方法.方法:利用高温稳定的焦谷氨酸肽酶,基因工程重组单抗样品在高温变性条件下,去除其N-端焦谷氨酸封闭.经还原SDS-PAGE和电印迹后,进行N-端氨基酸序列测定,并与电印迹后在PVDF膜上去封闭处理效果进行比较.结果:测定了17种基因工程单克隆抗体,其中有7个为重链去封闭处理后再进行测序的抗体样品,用2种方法都可顺利去除N-端封闭的焦谷氨酸,从而进行N-端氨基酸序列测定；如果不进行去封闭处理,部分样品无法进行N-端氨基酸序列测定.结论:2种方法都适于N-端具有焦谷氨酸封闭单抗的氨基酸序列分析.

关键词：基因工程、单克隆抗体、N-端氨基酸、序列测定、焦谷氨酸、聚丙烯酰胺凝胶电泳、电印迹

所属期刊栏目：32

分类号：R917(药物基础科学)

在线出版日期：2012-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1059-1063