HPLC法测定术后疲劳综合征大鼠骨骼肌ATP,ADP,AMP的含量
目的:建立改良的高效液相色谱( HPLC)法测定术后疲劳综合征(POFS)大鼠骨骼肌5’-三磷酸腺苷(ATP)、5’-二磷酸腺苷(ADP)、5’-磷酸腺苷(AMP)的含量.方法:采用色谱柱Hypersil ODS2(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温25℃;流动相为100 mmol·L-1磷酸盐缓冲液(含12 mmol·L-1的磷酸氢二钠和88 mmol·L-1的磷酸二氢钠,pH =6.5)-甲醇(99.9:0.1,体积比);流速1.0mL·min-1;紫外波长为254 nm;进样量20 μL.结果:ATP、ADP、AMP色谱峰在10 min内得到了较好的分离,在测定范围内均呈良好的线性关系,r分别为1.000,0.9996,0.9994;精密度试验日内RSD≤4.1%,日间RSD≤3.5%;稳定性试验RSD≤4.8%;重复性试验RSD≤2.3%;回收率在97.1%~ 105.4%之间,RSD≤4.8%.应用改良的方法对模型组大鼠和对照组大鼠骨骼肌ATP、ADP、AMP的含量进行检测.结果显示,与对照组相比,模型组大鼠骨骼肌ATP含量在术后第1,3d明显下降(P<0.05),ADP含量在术后第7d明显升高(P<0.05),术后第10 d升高特别显著(P<0.01),AMP含量在术后第10 d明显升高(P<0.05).结论:该方法操作简便,检测时间短,结果准确可靠,可以检测POFS大鼠骨骼肌ATP、ADP、AMP的含量,有助于POFS骨骼肌能量代谢的进一步研究.
高效液相色谱、三磷酸腺苜(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、磷酸腺苷(AMP)、骨骼肌、术后疲劳综合征、代谢研究
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R917(药物基础科学)
2012-01-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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