实时荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA方法在绒促性素和尿促性素生产中的应用

摘要：

目的:验证实时荧光定量PCR( Real - time PCR)检测绒促性素(HCG)和尿促性素(HMG)生产工艺中尿液、粗品和原料药中乙肝病毒DNA(HBV DNA)的方法,并用该方法对HCG和HMG生产工艺中关键点进行控制.方法:在不同浓度的乙肝阳性血中添加HCG或HMG的尿液、粗品和原料药,用Real - time PCR方法检测添加前后不同浓度乙肝阳性血中HBV DNA的浓度,计算出HBV DNA回收率,同时验证该方法的线性、重复性和灵敏度;用Real - time PCR方法对尿液、粗品和原料药样品进行HBV DNA检测,将检测出阳性的样品用ELISA方法检测,比较2种方法的检测结果差异.结果:Real - time PCR检测HBV DNA在104～ 107IU·mL-1范围内线性关系良好,r2=0.9969;HCG或HMG尿液、粗品和原料药中添加不同浓度乙肝阳性血,HBV DNA回收率为94.9％～103.8％;3次重复实验相对标准偏差(RSD)均小于5％;最低检出限为500 IU·mL-1.Real - time PCR检测出阳性的样品用ELISA方法检测乙肝表面抗原(HBsAg)均为阴性.结论:Real - time PCR可用于HCG和HMG生产工艺中尿液、粗品和原料药中HBV DNA的检测,同时也是用ELISA检测HCG和HMG中HBsAg的一种补充手段.

关键词：实时荧光定量PCR、乙肝病毒DNA、绒促性素、尿促性素

所属期刊栏目：31

分类号：R917(药物基础科学)

在线出版日期：2012-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1914-1917