运用优化的毛细管等电聚焦电泳方法评价叶酸受体α单抗电荷不均一性

摘要：

目的:用优化的clEF方法分析叶酸受体α单抗(McAb)及其参照品的异构体分布,根据等电点差异,将样品带电荷的异构体分离开来,更好地评价叶酸受体α单抗电荷不均一性.方法:毛细管等电聚焦电泳条件:中性涂层的毛细管50 μm×30cm(有效长度为20 cm)；阳极电泳缓冲液200 mmol·L-1磷酸,阴极电泳缓冲液300 mmol·L-1氢氧化钠；聚焦电压25 kV,迁移电压30 kV,温度20℃检测波长280 nm.结果:用优化后的方法使样品的电荷异构体能够有效分离,电泳图谱与参照品电泳图谱一致.样品主峰峰面积百分比为60.59％,等电点为7.78,次主峰面积百分比为24.38％,等电点为7.59,主峰与次主峰分离度为1.185 (USP).连续5针进样,主峰面积百分比的RSD为7.05％,等电点的RSD为0.31％；次主峰面积的百分比RSD为5.99％,等电点的RSD为0.69％；待测样品在12h内稳定.结论:采用优化的cIEF方法分析叶酸受体α单抗的电荷不均一性,具有更高的分离度,更好的重现性,为质量控制提供了更准确的手段.

关键词：毛细管电泳、等电聚焦、叶酸受体、单克隆抗体

所属期刊栏目：31

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家“重大新药创制”科技重大专项20092X09307-001;国家高技术研究发展计划2007AA021601;2007AA021204

在线出版日期：2011-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1489-1491