重组人B淋巴细胞刺激因子受体-抗体融合蛋白的肽图分析
目的:建立重组人B淋巴细胞刺激因子受体-抗体融合蛋白(TACI-Fc)的肽图分析方法.方法:将TACI-Fc蛋白用胰蛋白酶酶解、用尿素将蛋白分子变性、用二硫苏糖醇打断二硫键、用碘乙酰胺封闭巯基、用胰蛋白酶再次酶解等方法处理后,采用高效液相色谱分析,色谱柱为Vydac C18,(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A液为含0.1%三氟乙酸的水溶液,流动相B液为含0.1%三氟乙酸的乙腈溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为214 nm.结果:TACI-Fc蛋白被有效酶解,酶解后的各个片段能够很好的分离.结论:本法准确性高,重复性好,是重组人B淋巴细胞刺激因子受体-抗体融合蛋白结构确认的有效方法.
重组、淋巴细胞、刺激因子、受体、抗体、融合蛋白、肽图
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R917(药物基础科学)
2011-09-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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