应用ELISA测定睫状神经营养因子中卡那霉素残留量

摘要：

目的:建立ELISA检测卡那霉素残留量的方法并进行方法学验证,用于重组技术产品的质量控制.方法:采用间接竞争ELISA方法,样本中残留的卡那霉素将和微孔板上预包被的偶联抗原竞争抗卡那霉素抗体,加入酶标二抗后,用3,3,5,5-四甲基联苯胺(TMB)底物显色,样本吸光值与残留卡那霉素的含量成负相关,用酶标仪进行检测并用SOFT MAX分析软件进行分析.结果:ELISA方法测定卡那霉素残留量在0.5～40.5 ng·mL-1范围内线性良好,且符合四参数方程式:y=(A-D)/”1+(X/C)B”+D,r2≥0.99;板内变异小于15%,板间变异小于20%,实验重复性好,加标回收率在80%～120%之间;该方法检测与庆大霉素、盐酸四环素、链霉素和氨苄西林药物未显示交叉反应.应用该法对1批睫状神经营养因子(CNTF)原液的卡那霉素残留量进行测定,结果表明,每人用剂量CNTF(100 μg)卡那霉素残留量小于0.5 ng.结论:该方法具有灵敏度高、操作简便、检测迅速等特点,可用于重组技术产品中卡那霉素残留量的检定.

关键词：ELISA、卡那霉素、残留量、重组生物制品、质量控制

所属期刊栏目：31

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家科技重大专项课题2009ZX09307-001

在线出版日期：2011-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1064-1066