HPLC法同时测定大鼠尿和胆汁中4种儿茶素类活性成分
目的:建立一种反相HPLC法同时测定大鼠尿和胆汁中茶多酚(TP)的4种儿茶素类活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表没食子儿茶素(EGC)和表儿茶素(EC),为TP自大鼠尿和胆汁的排泄研究提供测定方法学.方法:采用RP-HPLC-UV法,使用Kromasil-C_(18)(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%枸橼酸溶液为流动相,洗脱方式采用组成梯度和流速梯度,检测波长为280 nm;尿或胆汁样品200μL中加入20%维生素C 20μL以及10μg·mL~(-1)香草醛内标溶液(IS)20μL,乙酸乙酯500μL液-液萃取2次,N_2流挥干后加20%乙腈水溶液100μL溶解,取上清液60μL进样分析.结果:EGCG、ECG、EGC、EC和IS的保留时间分别为11.81,18.02,6.21,10.42,16.36 min,各组分之间达基线分离且不受空白基质、代谢物和TP中其他成分的干扰.4种儿茶素类活性成分的尿/胆汁标准曲线的线性范围分别为0.5～10μg·mL~(-1)/0.2～5μg·mL~(-1)(EGCG)、0.125～5μg·mL~(-1)/0.2～5 μg·mL~(-1)(ECG)、2.5～50 μg·mL~(-1)/0.8～20μg·mL~(-1)(EGC)和1～20μg·mL~(-1)/0.4～10μg·mL~(-1)(EC)(r>0.9977).QC样品的日内和日间精密度RSD均小于10%;准确度均在90%～110%;EGCG、ECG、EGC、EC及IS在尿和胆汁中的萃取回收率均大于60%和80%.应用上述方法测定大鼠静脉注射TP 100 mg·kg~(-1)后尿和胆汁8 h总累积排泄分数为1.57%(EGCG)、2.00%(ECG)、8.33%(EGC)和10.67%(EC).结论:本文建立的RP-HPLC-UV法专属性及重现性好,准确可靠,可用于大鼠尿和汁胆中4种儿茶素类活性成分的同时测定及其体内排泄研究.
高效液相色谱、茶多酚、表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素、表儿茶素
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R917(药物基础科学)
大连市科技计划2002B4NS044
2010-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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372-378
