HPLC法同时测定大鼠血浆中茶多酚主要活性成分EGCG和ECG
目的:建立HPLC法同时测定大鼠血浆中茶多酚(tea polyphenols,TP)主要活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和表儿茶素没食子酸酯(ECG)的浓度,为TP药代动力学研究提供测定方法学.方法:采用RP-HPLC法,使用Kromasil-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,预柱为Kromasil-C18保护柱(4.6 mm×20 mm,10 μm),以乙腈-0.1%枸橼酸溶液(14:86)为流动相,流速1.5 mL·min-1,检测波长280 nm;血浆样品200 μL加75 μg·mL-1间苯二酚内标溶液10 μL,乙酸乙酯400 μL提取2次,N2流挥干后加10%乙腈水溶液100 μL,漩混1 min,4℃低温离心(7500 r·min-1)10 min后,取上清液60 μL进样分析.结果:EGCG和ECG的保留时间分别为9.92 min和29.51 min,间苯二酚的保留时间为5.96 min,三者之间达到基线分离,并不受空白血浆和代谢物以及茶多酚中其他成分的干扰.EGCG和ECG标准曲线的线性范围分别为0.5～300 μg·mL-1(r=0.9999)和0.1～60 μg·mL-1(r=0.9999);日内精密度RSD均小于5.7%,日间精密度RSD均小于11.2%;准确度为94.78%～110.6%;EGCG、ECG和内标的萃取回收率分别为85.73%～91.93%,79.08%～86.51%,91.88%～94.88%;血浆样品在-20℃保存下至少在21 d内和窒温保存下8 h内稳定.大鼠iv TP 100 mg·kg-1后血浆样品应用上述方法测定血药浓度,表明TP药动学行为遵循二室模型一级动力学.结论:本文建立的大鼠血浆中TP主要活性成分EGCG和ECG的HPLC测定方法准确,专属性及重现性好,且快速简便,可用于TP注射液的非临床药代动力学研究.
高效液相色谱、茶多酚(TP)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)
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R917(药物基础科学)
大连市科技计划2002B4NS044
2009-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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