SNP测定结合芯片电泳法快速鉴别人参和西洋参
目的:建立快速、准确的单核苷酸多态性(SNP)测定法鉴别人参、西洋参及2种样本的混合物.方法:根据ITS和5.8s基因上人参、西洋参的SNP位点设计特异性引物进行PCR扩增,每对PCR引物中有1条引物的3'端正好位于SNP位点上,当互补时发生PCR扩增反应,否则无扩增产物;另1条引物决定着PCR产物的长度.用芯片电泳法检测PCR产物的长度,根据PCR的电泳条带大小进行鉴别.为了减少非特异性扩增,在引物3'端的第3个碱基处人为引入1个错配碱基.结果:当退火温度为55℃时,出现252 bp条带的为人参,430 bp条带的为西洋参.该答别反应特异性高、重现性好、操作简便,能在同一反应中准确鉴别人参、西洋参.一系列不同比例的混合样本测定结果表明,可以检出5%的掺杂成分.电泳分离时间小于100 s.结论:通过测定人参和西洋参基因组DNA中的SNP,可以进行品种鉴别和质量控制,可用于中药材的快速鉴定.
人参、西洋参、单核苷酸多态性(SNP)、ITS和5.8s基因、芯片电泳
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R917(药物基础科学)
国家自然科学基金;南京军区卫生专业人才122工程资助项目
2009-04-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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