斑点杂交法测定Vero细胞DNA残留量的探针选择

摘要：

目的:为精确检测以Vero细胞为基质的生物制品中宿主细胞残余DNA含量.方法:将提取的Veto细胞DNA分别用不同时间的超声波和HindⅢ内切酶进行断链处理,电泳和序列分析并确定DNA片段长度,地高辛标记后制备成检测探针,测定已知的不同浓度的样品DNA和疫苗中DNA残留量.结果:HindⅢ内切酶处理断链后产生172 bp、344 bp、516 bp、688 bp不同长度的DNA,并选取172bp长度的DNA片断和超声波处理30 s的DNA长度为500～750 bp的DNA片断作为检测用探针.结论:两种方法处理的DNA探针检测DNA的灵敏度可达0.1 pg,重复性均较好,超声波处理的探针特异性优于酶切探针,并能成功的应用于疫苗产品中残余宿主细胞DNA的检测.

关键词：疫苗、Vero细胞、DNA、探针

所属期刊栏目：28

分类号：R917(药物基础科学)

在线出版日期：2009-02-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1892-1895