GM-CSF/IL-3融合蛋白质量标准的研究和建立

摘要：

目的:建立重组GM-CSF/IL-3融合蛋白的质控标准和检测方法,以用于该产品的常规质量控制.方法:用TF-1/MTT细胞增殖试验定量测定GM-CSF/IL-3融合蛋白体外生物学活性;用抗GM-CSF和IL-3的抗体分别进行WesternBlot进行鉴别试验;用C8-HPLC和SDS-PAGE测定蛋白纯度;用胰蛋白酶消化/C18-HPLC进行肽图分析;用顶空进样气相色谱法检测甲醇残留量;还原型SDS-PAGE测定融合蛋白相对分子质量;其他原液和成品检测项目参照2005年版中国药典三部的方法进行.结果:GM-CSF/IL-3融合蛋白的原液及成品与TF-1细胞的反应呈典型的S型曲线,符合四参数方程Y=(A-D)/”1+(x/C)^B)”+D,相关系数大于0.99,成品和原液的回收率均大于94%,RSD均小于20%;与GM-CSF和IL-3抗体进行的Westem Blot均为阳性;原液纯度大于95.0%;甲醇残留量小于0.005%,其他项目均符合2005年版中国药典三都要求.结论:建立的重组GM-CSF/IL-3融合蛋白质控标准和检测方法可以有效控制该制品的质量,并确保制品的安全与有效,已用于该制品的常规检定.

关键词：GM-CSF/IL-3、TF-1细胞、westem Blot、甲醇

所属期刊栏目：28

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2003AA2Z3481

在线出版日期：2008-12-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1605-1608