柱前衍生化反相高效液相色谱法定量测定重组人促卵泡激素中的单糖
目的:建立柱前衍生化反相高效液相色谱法定量测定重组人促卵泡激素(rhFSH)中的单糖.方法:采用20%TFA水解rhFBH,释放单糖,用邻氨基苯甲酸衍生化,采用反相高效液相色谱法测定.色谱柱为Jupiter C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相A为含0.15%正丁胺、0.25%磷酸、0.5%四氢呋喃的水溶液,流动相B为流动相A与乙腈比例为1∶1的溶液,梯度洗脱,流速0.85 mL·min-1;柱温30℃;荧光检测器:激发波长为230 nm,发射波长为425 nm.结果:葡萄糖胺、半乳糖、甘露糖、岩藻糖进样量分别在0.39~3.94 nmol(r=0.9994),0.29~5.85 nmol(r=0.9998),0.24~4.90 nmol(r=0.9998),0.05~1.03nmol(r=0.9996)范围内与峰面积呈良好的线性关系.平均加样回收率(n=9)分别为104.1%,104.2%,104.2%,98.0%;RSD分别为9.3%,1.8%,0.61%,6.0%.结论:该方法灵敏,专属性强,重复性好,可定量测定重组人促卵泡激素中的单糖.
柱前衍生化、高效液相色谱法、葡萄糖胺、半乳糖、甘露糖、岩藻糖、重组人促卵泡激素(rhFSH)
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R917(药物基础科学)
公益性行业科研专项2007-10-168
2008-12-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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