重组人纽兰格林二硫键分析

摘要：

目的:应用多种质谱技术确证重组人纽兰格林(rhNRGL)的一级结构及其二硫键定位.方法:(1)利用Q-FT-MS测定rhNRGL二硫键还原前后的精确相对分子质量,确定分子中二硫键数目;(2)应用MALDI-TOF/TOF-MS法测定rhNRGL的N端序列;(3)用ESI-MS/MS法测定rhNRGL的C端序列;(4)通过Trypsin和Glu-C 2种蛋白酶进行酶解,获得肽质量指纹谱,确证其序列及定位3对二硫键.结果:(1)测定rhNRGL还原前后的精确相对分子质量,两者相差6.0516,确证其主成分形成了3对二硫键;(2)串联质谱法测定rhNRGL的N端序列的5个氨基酸和c端序列的11个氨基酸.均与理论序列一致;(3)2种酶切肽谱的序列覆盖率分别为82%和64%,分析确证主成分二硫键配对正确,但同时存在少量错配二硫键异构体.结论:以上结果表明,该样品的一级结构正确,主要二硫键模式为:1-3,2-4,5-6.多肽药物的二硫键分析常常需要多种质谱及样品制备技术联合.

关键词：四极杆串联傅里叶质谱、串联飞行时间质谱、重组人纽兰格林(rhNRGL)、二硫键、多肽

所属期刊栏目：28

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：北京市自然科学基金2062022

在线出版日期：2008-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1302-1306