高效液相色谱质谱法测定格尔德霉素基因阻断变株产物

摘要：

目的:在研究格尔德霉素(GDM)生物合成的过程中利用基因阻断技术分别阻断GDM生物合成的起始基因3-氨基-5-羟基苯甲酸(AHBA)基因、含AHBA基因并与之相连的聚酮合酶(PKS)基因簇以及GDM生物合成相关的PKS和PKS后修饰基因簇CT-PKS获得3个GDM基因阻断变株.为了比较分析他们的次级代谢产物,采用高效液相色谱质谱法测定发酵液组分.方法:发酵液经过乙酸乙酯提取后用反相高效液相色谱分析.分析柱为迪马公司DiamonsilTM(钻石)C18(4.6 mm×150 mm,μm);流动相是40%～100%甲醇,30 min梯度洗脱;流速1 mL·min-1;二极管阵列检测器(DAD),检测波长304nm.利用电喷雾质谱(ESI)通过正负离子扫描获得相应化合物的相对分子质量信息;利用质谱的源内裂解技术获得相应化合物的结构信息.结果:检测发现,阻断2个不同的GDM生物合成基因以后主要产生2个不同于GDM的化合物.结论:该方法可快速、准确地对基因工程变株发酵新产物进行早期鉴别,指引后续的化学分离,并用于其他GDM基因阻断变株产物的定性.

关键词：格尔德霉素(GDM)、发酵产物、高效液相色谱、电喷雾质谱

所属期刊栏目：28

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2001CCA00500

在线出版日期：2008-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：670-673