重组天花粉蛋白突变体质量标准的研究和建立

摘要：

目的:建立重组天花粉蛋白突变体(MTCS)的质量控制标准和检测方法.方法:用HL-60细胞株/MTT比色法定量测定MTCS体外生物学活性;用C4-HPLC和非还原型SDS-PAGE测定蛋白纯度;用毛细管电泳法测定等电点;用胰酶消化/RP-HPLC测定肽图;用还原型SDS-PAGE测定蛋白分子量等.结果:MTCS原液和成品对HL-60细胞的反应曲线与参考品的反应曲线一致,都呈现典型的S型曲线并且符合四参数方程式Y=((A-D)/(1+(X/C)^B))+D,相关系数大于0.99;蛋白质纯度大于95.0%;等电点为9.16;蛋白原液的肽图与参考品肽图图形一致;分子量为2.72×104.结论:建立的MTCS质量控制标准和检测方法可以有效控制该制品的质量,并用于该制品的常规检定.

关键词：天花粉蛋白突变体、HL-60细胞株、HPLC、等电点

所属期刊栏目：26

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：上海市现代生物与新药产业发展基金

在线出版日期：2007-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1225-1228