噬菌体展示CD28、CD137及生物活性测定
目的:以噬菌体展示具有天然结构的人CD28、CD137分子胞外区,检测其抗原性和生物活性,为CD28、CD137拮抗性类肽药物的筛选奠定基础.方法:构建CD28、CD137噬菌粒表达载体pComb3H-CD28、pComb3H-CD137,以噬菌体展示系统展示CD28、CD137分子胞外区.以ELISA、流式细胞仪检测噬菌体展示CD28的抗原性和与CD80的结合力,ELISA检测噬菌体展示CD137的抗原性,MTT法检测噬菌体展示CD28、CD137的生物活性.结果:成功构建重组噬菌粒载体pComb3H-CD28、pComb3H-CD137,并以噬菌体展示系统展示CD28、CD137分子.ELISA结果显示,噬菌体展示CD28可与抗CD28抗体特异性结合,也可与CD80特异性结合;FCM结果显示,噬菌体展示CD28可与Jurkat细胞表面CD28竞争结合抗CD28抗体,也可与Raji细胞表面CD80结合.ELISA结果显示,噬菌体展示CD137可与抗CD137抗体特异性结合.体外生物活性实验显示,噬菌体展示CD28、CD137可抑制抗CD28抗体、抗CD137抗体刺激的人外周血淋巴细胞增殖反应.结论:利用噬菌体展示系统成功展示CD28、CD137分子,噬菌体展示CD28、CD137具有抗原性及生物活性,为以CD28、CD137为靶点体外高通量筛选CD28、CD137拮抗性类肽奠定基础.
CD28、CD137、噬菌体展示
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R9(药学)
国家自然科学基金;国家自然科学基金
2007-07-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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