RP-HPLC法分析重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)肽图谱
目的:建立重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)[rhGLP-1(7-36)]胰蛋白酶或V8蛋白酶肽图分析方法.方法:酶解缓冲液分别为1%碳酸氢铵缓冲液(pH 7.8)和磷酸盐缓冲液(pH 7.8),酶与底物的比例为1:10,酶解时间分别为3 h和6h.采用ODS柱(250 mm ×4.6mm,5 μm),以三氟醋酸-水(0.1:100)为流动相A,三氟醋酸-水-乙腈(0.1:5:95)为流动相B.胰蛋白酶洗脱梯度:0-30 min,流动相A与B的比例为80:20→55:45.V8蛋白酶洗脱梯度:0-8 min,流动相A与B的比例为99:1→95:5;8-55 min,比例为95:5→48:52.流速:1.0 mL·min-1,检测波长214 nm,柱温:37℃.结果:无论用胰蛋白酶或V8蛋白酶酶解rhGLP-1(7-36),控制好酶与底物的比例及酶解的时间,都可以得到重现性好的稳定的肽图.结论:本方法可用于重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)胰蛋白酶和V8蛋白酶肽图分析,简便,可行.
RP-HPLC、重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)[rhGLP-1(7-36)]、肽图谱
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R927.2;R284.1;O657.7+2
2007-07-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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