用IE-HPLC、PAGE分析合成的硫代寡核苷酸相关物质”n-1”、”n-2”和”n-3”

摘要：

目的:分析合成的n=20-mer硫代寡核苷酸中相关物质”n-1”、”n-2”和”n-3”杂质失败序列.方法:离子交换高效液相色谱(IE-HPLC)法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE).色谱柱为Gen-PakTMFAX离子交换柱(4.6 mm×100 mm),流动相A为62.5 mmol*L-1三羟甲基氨基甲烷盐酸(Tris*Cl),pH 8.15,流动相B为62.5 mmol*L-1 Tris*Cl,pH 8.15,2.5 mol*L-1 LiCl,流动相C为100%乙腈;梯度洗脱条件为B:30%→50% 30 min,C:恒为20%;流速为0.75 mL*min-1;检测波长为260 nm.PAGE分析采用20%变性聚丙烯酰胺凝胶,恒定功率25 W进行电泳.结果:IE-HPLC分离纯化出3种相关物质,通过PAGE印证了它们是由于合成偶联不完全而产生的n-1、n-2和n-3的杂质失败序列.结论:所用离子交换高效液相色谱法能将合成的硫代寡核苷酸中相关物质”n-1”、”n-2”和”n-3”杂质失败序列与全序列n一一分离出来,对硫代寡核苷酸的纯化和分析具有重要的参考价值.

关键词：硫代反义寡核苷酸、相关物质、离子交换高效液相色谱法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法

所属期刊栏目：22

分类号：R9(药学)

在线出版日期：2007-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：371-375