应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱和N端测序鉴定重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的结构

摘要：

目的:应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和N端测序方法鉴定重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的结构.方法:1.用Edman降解法进行N端测序.2.应用MALDI-TOF-MS测定分子量并鉴定纯度.3.通过还原、烷基化确定rhGM-CSF分子中二硫键数目.4.通过蛋白内切酶Glu-C酶切的肽质量指纹谱确证氨基酸序列并确证其中两对二硫键的配对.结果:1.测定的rhGM CSF N端15个氨基酸序列与从cDNA推导的序列一致.2.测定的rhGM-CSF分子量与理论计算值一致.3.证明rhGM-CSF没有自由巯基,含有两对二硫键,与理论值一致.4.证明rhGM-CSF的氨基酸序列是正确的,并确证其中的两对二硫键配对正确.结论:确证重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的结构是正确的,没有修饰、变异和氨基酸的丢失.应用的方法灵敏、准确、可靠.

关键词：重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱、N端测序、肽质量指纹谱

所属期刊栏目：21

分类号：R917(药物基础科学)

在线出版日期：2007-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：312-316