抗牙龈卟啉单胞菌卵黄抗体的制备、纯化和生物学特性鉴定

摘要：

目的:制备特异性抗牙龈卟啉单胞菌( Pg)的鸡卵黄免疫球蛋白( IgY)并检测其生物学特性. 方法:厌氧培养牙龈卟啉单胞菌,将甲醛灭活的菌体经翅膀下浅层肌肉免疫150日龄罗曼母鸡3次,每次间隔10 d. 取鸡蛋用两步硫酸铵沉淀法提取IgY,BCA法测定蛋白质含量,ELLSA法检测纯化后IgY的特异性和抗体效价变化,并进行 SDS-PAGE 和 Western blotting 分析. 观察抗 Pg-IgY 对红细胞凝集的抑制作用.结果:经3次免疫后,抗体滴度最高可达25 600,纯化后每个鸡蛋可得约70 mg IgY抗体;SDS-PAGE分析,纯化的IgY有1条主要蛋白带,相对分子质量( Mr)为180 kD,纯度为65%; Western blotting分析, 该IgY抗体可识别抗原Pg. 每孔3. 125 μg Pg-IgY可有效抑制Pg的红细胞凝集活性;1 mg/mL Pg-IgY可有效抑制Pg生长.结论:本研究得到的IgY特异性强,产量和纯度高.

关键词：牙龈卟啉单胞菌、免疫球蛋白Y、卵黄抗体

所属期刊栏目：25

分类号：R780.2(口腔科学)

资助基金：安徽省自然科学基金1308085MH130,1408085MKL28安徽安科生物校企合作项目K2015011

在线出版日期：2015-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：459-464,497