3D培养牙周膜干细胞生物学特性的初步研究

摘要：

目的：研究悬滴法3D培养和2D贴壁培养的牙周膜干细胞（PDLSCs）生物学特性的差异。方法：改良酶消化组织块法分离培养PDLSCs，分别行2D贴壁培养及3D培养（3D培养按不同细胞接种数分为2．5×104，5×104及1×1053组），培养96 h后分别用Live／Dead染色法分析细胞活性；流式细胞术检测干细胞表面标记物；然后对2D、3D培养的PDLSCs进行矿化诱导，茜素红染色及荧光定量PCR检测矿化结节形成情况以及矿化相关基因ALP和OPN mRNA的表达水平。结果：3D培养的PDLSCs可形成致密的细胞聚合物，2．5×104组PDLSCs细胞聚合物中心未见坏死现象，5×104组和1×105组则有较为明显坏死现象；3D和2D培养的PDLSCs间充质干细胞表面标记物的阳性表达率均无显著差异（P＞0．05）；茜素红染色和荧光实时定量PCR结果显示，3D培养的PDLSCs形成矿化结节的数量及其矿化相关基因ALP OPN mRNA的表达水平均显著高于2D培养的细胞（P＜0．05）。结论：3D悬滴培养法是一种理想的PDLSCs培养方法。

关键词：牙周膜干细胞、3D培养、矿化分化

分类号：R780.2(口腔科学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目81371137

在线出版日期：2014-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：264-268,299