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Runx2介导TGF-β1调控成釉细胞MMP20基因表达的研究

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目的:研究Runx2在TGF-β1调控小鼠成釉细胞金属基质蛋白酶- 20(matrix metalloproteinase 20,MMP20)基因表达中的作用.方法:首先利用双荧光素酶基因报告系统分析TGF-β1对MMP20基因启动子转录活性的影响;然后利用染色体免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)方法观察Runx2与MMP20特异性结合位点之间的相互作用,并利用基因定点突变和双荧光素酶基因报告系统分析Runx2对MMP20基因启动子转录活性的影响;最后运用小RNA干扰技术使Runx2基因沉默,实时定量RT-PCR技术观察TGF-β1诱导MMP20基因表达的改变.结果:TGF-β1刺激成釉细胞后,MMP20启动子在-87~+23区域转录活性无明显变化外,其他各区域转录活性均增强.利用ChIP研究发现Runx2与MMP20基因核心启动子的特征性序列“TGTGGG”相互作用;将该特征性序列由“TGTGGG”突变为“TGTAAG”后,利用双荧光素酶基因报告系统发现Runx2对MMP20基因启动子转录活性的影响减弱;利用小RNA干扰技术使Runx2基因沉默后,TGF-β1上调MMP20基因表达的作用减弱.结论:TGF-β1通过转录因子Runx2调控成釉细胞MMP20的表达.

Runx2、TGF-β1、金属基质蛋白酶-20

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R780.2(口腔科学)

国家自然科学基金30973327;山东省自然科学基金ZR2010HM076

2012-04-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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61-1254/R

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