RA、SHH和bFGF体外诱导人牙髓干细胞向神经细胞分化的研究
目的:研究体外使用全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,RA)、音猬因子(sonic hedgehog,SHH)、碱性成纤维生长因子(fibroblastgrowth factor-basic,bFGF)体外诱导人牙髓干细胞(dental pulp stemcells,DPSCs)分化为神经细胞的可行性,以优化DPSCs向神经细胞分化的诱导条件.方法:从因正畸或阻生拔除的第一前磨牙或第三磨牙中提取牙髓,采用酶消化及过滤法得到单细胞悬液,有限稀释法培养分离的原代DPSCs,并进行克隆化培养,检测STRO-1的表达.将DPSCs分别接种于含有不同浓度诱导液,MTT法检测三种因子对细胞增殖能力的影响,免疫荧光法检测微管相关蛋白(microtubule-associated protein-2,MAP-2)、神经元烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)的表达.透射电镜观察诱导前后细胞超微结构.结果:克隆来源细胞的STRO-1表达阳性.三种因子联合诱导促增殖作用最强,与其他组比较,差异有统计学意义(P<0.05).除对照组外,各诱导组均检测出神经元样细胞,其中以三因子联合诱导组阳性细胞表达率最高,促分化作用均优于其他组.透射电镜观察到神经元样细胞表现.结论:三因子联合可以在体外有效诱导人DPSCs转化为神经细胞.
人牙髓干细胞、全反式维甲酸、音猬因子、碱性成纤维生长因子、分化
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R780.2(口腔科学)
黑龙江省自然科学基金D200856
2011-06-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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