变异链球菌葡聚糖结合蛋白A葡聚糖结合区真核表达质粒的构建及其在哺乳动物细胞中的表达

摘要：

目的:构建变异链球菌葡聚糖结合蛋白A葡聚糖结合区的真核表达质粒pVAX1-GbpA/GBD,并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达.方法:利用基因重组技术构建真核表达质粒pVAX1-GbpA/GBD,经酶切分析和测序分析鉴定后,通过脂质体转染法,将其转染至COS-7细胞中,免疫组化SABC法检测其在细胞中的表达.结果:重组质粒pVAX1-GbpA/GBD经EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切证实携带1.2 kb目的基因片段,经测序分析,目的基因正确插入到预先设计的载体位点处.pVAX1-gbpA/GBD转染的细胞胞质呈褐色染色,pVAX1空载体质粒转染的细胞胞质中无着色.结论:成功构建防龋基因疫苗真核表达质粒pVAX1-GbpA/GBD,所携带的基因序列正确,能够在真核细胞COS-7中正确表达目的蛋白.

关键词：变异链球菌、葡聚糖结合蛋白A、哺乳动物细胞、真核表达、pVAX1

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分类号：R780.2(口腔科学)

资助基金：贵州省优秀青年科技人才基金黔科合人字20050509;贵州省省长基金黔科教办200407;贵州省教育厅重点基金黔教科2004119

在线出版日期：2010-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：310-313,340