10.3969/j.issn.1005-2593.2006.01.001
人成釉蛋白基因在COS-7细胞中的表达
目的:通过构建真核表达载体,在COS-7细胞中表达人成釉蛋白基因.方法:分别将人成釉蛋白基因克隆入非融合和融合真核表达载体pcDNA 3.1和pEGFP-C3中,证实克隆正确后,用脂质体介导将载体转染哺乳动物细胞COS-7,通过免疫组织化学、Western Blot等方法检测成釉蛋白在哺乳动物细胞中的表达.结果:表达的绿色荧光蛋白融合蛋白所发出的荧光位于细胞浆中,胞核中无荧光,与免疫组化结果一致,说明人成釉蛋白位于细胞浆中.Western Blot检测显示在COS-7细胞中表达的成釉蛋白的分子量为65×103,分泌至培养基中的成釉蛋白的分子量为62×103.结论:成功在哺乳动物细胞中表达了人成釉蛋白,为研究成釉蛋白合成后的修饰加工和成釉蛋白的结构,为今后进一步研究成釉蛋白结构和功能的关系奠定了基础.
人、成釉蛋白、免疫组化、绿色荧光蛋白、Western Blot
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R780.2(口腔科学)
中国科学院资助项目30300386;军队基金012089;第四军医大学校科研和教改项目
2006-03-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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