10.3969/j.issn.1005-2593.2002.05.002
人重组成釉蛋白C端肽在大肠杆菌中的表达及初步纯化
目的:在大肠杆菌中表达人重组成釉蛋白C 端肽,并对重组蛋白进行纯化,为进一步制备抗人成釉蛋白抗体和功能研究奠定基础.方法:将编码人成釉蛋白C 端肽的基因片段克隆到大肠杆菌表达载体pRSET-A上,构建表达质粒pRSET-A-AMBN,以大肠杆菌E. coli BL21(DE3)为宿主菌进行诱导表达,表达产物经镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)柱进行亲和层析纯化.结果:工程菌在IPTG诱导3h后,在SDS-PAGE上出现一条新的蛋白带,相对分子量(Mr)为52×103,以可溶形式存在,经Ni-NTA柱纯化后获得纯度大于95%的人重组成釉蛋白C 端肽.结论:获得Mr为52×103的人重组成釉蛋白C 端肽.
成釉蛋白、基因表达、金属螯合亲和层析
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R780.2(口腔科学)
军队重点研究项目012089
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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