人成釉蛋白编码区cDNA的克隆和N端肽的融合表达

摘要：

目的:克隆人成釉蛋白(Ameloblastin)编码区基因并原核表达其N端肽.方法:抽提人牙胚总RNA,用Oligo(dt)作引物逆转录合成人牙胚cDNAs,然后利用PCR方法,从cDNAs中扩增出人成釉蛋白编码区cDNA序列,将所得基因片段插入pGEM-T Easy质粒载体,转化入大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆,提取重组质粒DNA,通过限制性酶切和核苷酸序列测定鉴定阳性克隆.将所克隆序列的5'端558bp的片段连入原核表达载体pGEX-4T1并在大肠杆菌中诱导表达,SDS-PAGE分析.结果:克隆片段测序结果与GenBank数据库收录的序列一致,经诱导表达见Mr为46×103的融合蛋白.结论:克隆到人成釉蛋白编码区cDNA,并在大肠杆菌中表达了人成釉蛋白N端肽.

关键词：成釉蛋白、cDNA、聚合酶链反应

所属期刊栏目：12

分类号：Q785;Q786;R780.2(基因工程（遗传工程）)

资助基金：全军重点项目012089

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：172-174